1996年，因出演石明华执导的电视剧《天职》而正式出道，在片中饰演失学的少年“剪刀”。1998年，王坤参演的清装宫廷剧《还珠格格》播出，在剧中饰演围观杜小姐抛绣球的柯峰。

2000年，在张国立、张铁林、袁立主演的清装剧《铁齿铜牙纪晓岚》中饰演杜小月的丈夫祝君豪；同年，与诺娃共同出演刘晓光执导的电影《郊外那边是俄罗斯》，饰演青年教师肖平   。

2001年，与马苏合作出演李玟的音乐录影带《不变的诺言》；同年，在运动剧《绿茵小子》中饰演爱踢球的学霸黄兵。2002年，在章明执导的剧情片《秘语17小时》中饰演时尚青年张建力。

2003年，参演廖学秋、杨立新、陈宝国主演的都市剧《大鳄无形》；同年，在与秦海璐、邱心志等共同出演的古装剧《骊姬传奇》中饰演大将军杜原。

2004年，与陈数、于荣光共同出演商战剧《穿越围城》，在剧中饰演公司总裁周耀文；2005年，在郭达主演的搞笑剧《时髦老爹》中饰演孙守信的女婿周容光。

2006年，参演刘烨、孙俪主演的近代剧《天和局》。2007年9月22日，王坤主演的家庭伦理剧《无法抗拒》在杭州电视台影视频道播出   ；同年，出演了个人首部室内情景喜剧《月亮酒吧》，在剧中饰演酒吧总经理马威   。

2008年，在孙树培执导的武侠视剧《庚子风云》中饰演郁郁寡欢的光绪皇帝；同年，他还参演了刘晓龙执导的抗战剧《虎穴剿匪》。

2009年4月14日，参演的古装神话剧《宝莲灯前传》开播，其在剧中饰演原本凶神恶煞，却最终弃恶从善，成为二郎神兵器的三首蛟   。2010年，在李作楠执导的古装剧《南岳奇人王船山》中饰演大将军瞿武。

2011年10月18日，参演的毛尉光执导的家庭伦理剧《娘家的故事3》在安徽卫视播出   ；同年，与杜淳、王姬联合出演了郑克洪执导的辛亥革命100周年献礼剧《大汉口》，在剧中王坤饰演商务会长叶炳均。2012年12月，出演的古装神话剧《妈祖》在CCTV-8播出，王坤饰演一位与知县斗争的督工   。

2013年8月，参演的周德华执导的家庭伦理剧《左手亲情右手爱》在中央电视台播出，在剧中饰演罗家大女婿曹国平   ；9月，出演了由张博昱、祝东宁执导的都市励志情感剧《华丽上班族》，在剧中饰演广告公司职员沈凯   ；10月，与巍子、张洪睿联合出演的抗战剧《义勇义勇》，在其中饰演商务会长阎成龙；同年，出演的由赖水清执导的古装武侠剧《天龙八部》播出，王坤在剧中饰演大理皇宫四大护卫之一的朱丹臣。

2014年7月4日，出演的的青春校园科幻剧《你好外星人》在爱奇艺播出，王坤在剧中饰演霸道总裁韩武；7月15日，参演的现代剧《湄公河大案》在中央电视台综合频道黄金档播出   。

2015年3月，在李依晓、陈键锋主演的神话剧《封神英雄2》中饰演人族猎户王大柱；7月，与安以轩、陈紫函等共同出演的古装剧《金钗谍影》播出，在剧中饰演多罗武功郡王阿林泰；10月，出演公益电影《春天的向日葵》，饰演片中残障儿童的爸爸夏明。

2016年1月，出演以20世纪30年代的上海滩为背景的年代剧《翡翠恋人》，王坤在剧中饰演警察局长孙怀中；3月，在湖南经视播出的抗战剧《枪口》中饰演性格懦弱的商务会长饶启正；4月3日，出演的古装传奇剧《武神赵子龙》在湖南卫视首播，王坤在剧中饰演性格豪爽的鲁肃   ；8月，受邀参加旅游卫视的综艺栏目《梅卿快车道》   ；11月3日，受邀做客贵州卫视讲述节目《故事中国》   ；10月，参演的革命战争剧《红旗漫卷西风》在东方卫视首播，在中饰演红军总指挥于华涛   。

2017年3月，其参演的抗日剧《火线孤城》开机，在该剧中饰演八路军团长于卫国；9月，在祝东宁执导的抗战剧《铁血荣耀》中饰演神枪手杨百步；10月，王坤赴泰国拍摄微电影《象画情缘》，影片获得泰国文化部的认可与资金支持   ；11月2日，凭借微电影《象画情缘》获得首届中泰国际微电影节最佳男主角奖   ；12月30日，在爱奇艺上线的动作喜剧电影《绝色保镖之洪门天赐》中饰演城府深沉、背信弃义的管家洪三儿   。

2018年，参演的都市轻喜剧《你的未来已签收》播出，在剧中饰演冷酷理智严苛的霸道总裁杨毅   。2019年1月，由陈秋竹执导的电影《错位囧途》上映，王坤在片中饰演阴险毒辣、心机厚重的霸道总裁张力   。

2021年，参演电视剧《只是结婚的关系》。