1978年初，登银幕在故事片《傲蕾·一兰（上、下）》中饰傲蕾·弗兰晶。不久后在影片《漓江春》中饰华侨少女黄莎莉，开始展露头角。

1981年，应长春电影制片厂邀请，在电影《第三个被谋杀者》中扮演主人公方召的妹妹方卉。1984年，参加电影《欢欢笑笑》的拍摄。

1987年，在北京电影制片厂拍摄电影《谁是第三者》中饰演曾璐璐，受到好评。

1988年，在《行窃大师》中饰高晓莉，并在侦破片《豺狼计划》中饰改邪归正的黑社会分子林美珊，戏路有较大突破。

1989年，与杜雨露、许亚军主演探案电影《无罪杀手》，一人分饰魏敏，魏莲姐妹两个角色。

1995年，以后她的演艺之路却变得坎坷起来，事业“进入了高不成低不就的尴尬期”。这时她的工作关系调到北京人民艺术剧院，事业也因此出现转机。

1997年，梁丹妮在人艺演的第一个角色是话剧《古玩》里的“水珠儿”，之后在《开市大吉》饰演汪太，一个肥胖臃肿、穿着古怪、极具荒诞色彩的角色。同年，在郝蕾﹑李晨﹑牛萌萌主演电视剧《十七岁不哭》中饰宇凌妈，还与冯远征、江珊、梁冠华共同出演电视剧《戊戌风云》。1998年，出演电视剧《明日有晴天》。

2000年，与冯远征、尤勇主演电视剧《终极使命》，在剧中饰演韩眉。

2001年，与黄志忠、杜源共同出演电视剧《欲望时代》。同年在佟大为、陆毅、梅婷、乔振宇主演电视剧《海洋馆的约会》中饰演罗刚母。

2002年，在丁志诚、王茜、张潮主演的《重案六组2》中饰演红姐。

2003年，参与冯远征、梅婷主演的都市轻喜剧《平安是福》中饰演安翠芬。同年，在为纪念抗日战争胜利60周年特别制作的电视剧《滴血玫瑰》中饰演凌母。

2004年，主演话剧《全家福》，饰演剧中的春秀婶，凭借这一角色获话剧界的最高奖项金狮奖。

2006年，在《常回家看看》和《男人底线》两个剧组演出，往返于大连和北京两地，同时饰演两个性格不同的中年妇女，在亲情伦理剧《常回家看看》中扮演了一位市井、泼辣的大嫂，而在《男人底线》里她又以一个怨妇的形象示人。同年，还在徐帆、冯远征、齐欢主演的《最后的王爷》中与冯远征饰演母子。

2008年，在陈坤、李小冉、罗海琼主演的《故梦》中饰演秦朱氏。同年在《破茧而出》饰演蓝姨。

2009年，与冯远征、陈冲共同主演电视剧《人到中年》，饰演邱东兰。

2010年，在杜淳、董璇、马伊琍主演的电视剧《青春期撞上更年期》中饰演贺淑珍。同年，在黄志忠、左小青﹑何琳主演电视剧《家常菜》中扮演的“打酱油”的邻居，在冯远征 ﹑周显欣主演的《侦探小说》中客串地下党，在于震﹑陈紫函主演的《密使》中饰演罗太太。

2011年，在王宝强、陶虹主演电视剧《我的父亲是板凳》中饰演乔芝兰。同年，在《大厨》饰演焦敏。在贾乃亮、白百何、高露主演的当代都市情感剧《离婚前规则》中饰演王明轩的母亲李秀兰。在《最爱你》中饰演赵雅芝。在李晟、张晓晨主演的《离爱》中饰厉敏。在《是爷们儿向前走》中饰演田彩霞。

2012年，在李晨、任重、杜淳主演的《北京青年》中饰演郑玉英。同年，在陶红、董勇主演中国首部公益亲情剧《宝贝儿回家》中饰演张莹。出演赵立新、闫妮主演都市家庭轻喜剧《煮妇也疯狂》。

2015年10月1日，家庭偶像电视剧《闺蜜嫁到》开机，梁丹妮在剧中演绎接地气、善良、充满爱心的妈妈。

2016年3月，在抗战年代剧《大地惊雷》中饰演出身大户人家的美丽主妇。同年主演反映母爱题材的公益电影《我们》，凭借该片获得第七届北京国际电影节网影盛典年度十佳网影戏骨奖，在第六届北京国际微电影节组委会特别贡献奖，第四届亚洲微电影金海棠奖最佳女演员。

2017年6月，参演麦田执导的古装网剧《花落宫廷错流年》，在剧中饰演的康熙妃子惠妃，在九子夺嫡之中有着不可或缺的推动作用。受邀请参加了GGV主办的TED演讲，9月，受邀参加江苏卫视文化情感特色节目《阅读·阅美》第二期，担任推荐人。